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簡(jiǎn)要描述:產(chǎn)品品牌:普利萊產(chǎn)品貨號(hào):P1258-50產(chǎn)品名稱:植物總蛋白提取試劑產(chǎn)品規(guī)格:50ml/100ml普利萊 植物總蛋白提取試劑-常備現(xiàn)貨
品牌 | APPLYGEN/普利萊 | 貨號(hào) | P1258-50 |
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規(guī)格 | 50ml/100ml | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 提取多種植物組織和細(xì)胞如蘋(píng)果、花生、土豆、煙葉、菠菜、梅花等。 |
普利萊 P1258-50 植物總蛋白提取試劑
普利萊 植物總蛋白提取試劑-常備現(xiàn)貨
產(chǎn)品貨號(hào):P1258-50
產(chǎn)品名稱:植物總蛋白提取試劑
產(chǎn)品規(guī)格:50ml/100ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
適用范圍:
提取多種植物組織和細(xì)胞如蘋(píng)果、花生、土豆、煙葉、菠菜、梅花等。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
描述:
植物組織成分復(fù)雜含有較多的酚類物質(zhì)、多糖、色素、次生代謝產(chǎn)物,這使得植物蛋白質(zhì)的分離提取變得困難。本試劑適用于多種植物根、莖、葉及果實(shí)等的新鮮或凍存組織,能夠快速有效地提取植物中的可溶性和疏水性蛋白成分,有效去除組織中所含的多糖、脂質(zhì)、此生代謝產(chǎn)物等干擾蛋白研究的成分,同時(shí)能夠使提取的蛋白質(zhì)處于最佳的活性狀態(tài)和檢測(cè)狀態(tài),適用于酶學(xué)活性測(cè)定,單向、雙向蛋白電泳、Western Blot和免疫共沉淀等實(shí)驗(yàn)。
儲(chǔ)存:4oC避光保存,12個(gè)月有效
操作步驟;
1. 組織勻漿,必須充分勻漿,這一步非常關(guān)鍵。
(1) 凍存組織勻漿:預(yù)先將研缽至于-20oC或-70oC冰箱內(nèi)預(yù)冷。取液氮凍存的植物組織,放入冰凍的研缽內(nèi)研磨成粉末,注意使樣本處于冰凍狀態(tài),如樣本顏色加深或變黑通常表明已經(jīng)融化。將研磨好的組織轉(zhuǎn)移到新管,按每200mg植物組織加0.5mL比例加入提取試劑,混勻后冰上放置20分鐘,期間可數(shù)次顛倒混勻,使蛋白溶解。
(2) 新鮮組織勻漿:取新鮮組織放入研缽中,按每200mg植物組織加0.5mL比例加入提取試劑,充分研磨至勻漿液中看不到大的塊狀或者片狀組織,保證樣本wan全研磨破碎。轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi),冰上放置20分鐘。
2. 離心:12000g離心15分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管中,直接使用或-70oC儲(chǔ)存。
3. 后續(xù)處理:
(1)如果進(jìn)行酶學(xué)測(cè)定,直接取蛋白上清液加入反應(yīng)。
(2)沉淀蛋白;首先估計(jì)制備的蛋白上清液體積。方法一:加1/3體積30%三氯醋酸水溶液;方法二:加入6-10倍體積的1:1混合的丙酮/乙醇,-20oC沉淀1小時(shí)或過(guò)夜。4oC,5000g離心10分鐘,棄上清,空氣略干沉淀,用適量的1*SDS上樣緩沖液溶解沉淀,95 oC變性5分鐘,上樣電泳。適于進(jìn)行SDS-PAGE、Western Blot、雙向電泳等。
(3)直接電泳:需加入4*SDS上樣緩沖液。上清如有少量色素一般不會(huì)影響蛋白電泳。
(4) 免疫共沉淀:用蒸餾水等比例稀釋提取的蛋白上清,進(jìn)行免疫共沉淀。
(5) 蛋白定量:用BCA蛋白定量試劑盒進(jìn)行定量(產(chǎn)品貨號(hào)P1511).
常見(jiàn)問(wèn)題集解決方法:
1. 提取的蛋白量少:1)組織蛋白含量較少,如水果等,可增加組織量;2)組織勻漿不充分,如纖維較多的組織破碎較困難,應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)研磨時(shí)間;3)組織過(guò)老或水分丟失致使其干燥,應(yīng)盡量選用新鮮較嫩的組織;4)甲醇或丙酮沉淀后蛋白溶解不充分,應(yīng)延長(zhǎng)溶解時(shí)間或使用較強(qiáng)的蛋白溶解劑。
2. 蛋白質(zhì)量不佳:1)提取的蛋白有多酚或色素等雜質(zhì)殘留,可重復(fù)用丙酮或甲醇沉淀;2)蛋白質(zhì)降解,操作個(gè)步驟應(yīng)迅速,在冰上進(jìn)行,用戶也可以自行選擇加入蛋白酶抑制劑。
普利萊 植物總蛋白提取試劑-常備現(xiàn)貨
產(chǎn)品訂購(gòu)信息:
P1258-50 植物總蛋白提取試劑 50ml/100ml
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