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簡要描述:產(chǎn)品品牌:陶術(shù)產(chǎn)品貨號:C0066產(chǎn)品名稱:人 CD34 + 細胞富集試劑盒(陰性選擇)產(chǎn)品規(guī)格:2mL (for 1×10^9 cells)陶術(shù) 人 CD34+細胞富集試劑盒(陰性選擇)
品牌 | 陶術(shù)生物 | 貨號 | C0066 |
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規(guī)格 | 2mL (for 1×10^9 cells) | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
陶術(shù) C0066 人 CD34 + 細胞富集試劑盒(陰性選擇)
陶術(shù) 人 CD34+細胞富集試劑盒(陰性選擇)
產(chǎn)品貨號:C0066
產(chǎn)品名稱:人 CD34 + 細胞富集試劑盒(陰性選擇)
產(chǎn)品規(guī)格:2mL (for 1×10^9 cells)
產(chǎn)品簡介:
TargetMol 的人 CD34+ 細胞分選試劑盒 (陰選) 提供超順磁性微珠,采用陰性分選法,從人外周血單個核細胞(PBMC)中分離出 CD34+ 細胞。原理是選用生wu素(biotin)標記的單克隆抗體對非目標細胞(非 CD34+ 細胞)進行標記,然后通過鏈霉親和素(streptavidin)標記的磁珠對非目標細胞進行清除,從而達到人外周血 CD34+ 細胞分選的目的。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準
活性高:分選后細胞功能保持完好,無異常激活,無抗體和磁珠標記。
易操作:無需使用分離柱,通過磁力架即可實現(xiàn)目標細胞分離。
速度快:最快 30 min 即可完成 CD34+ 細胞富集。
富集效率高:一步富集可達到10倍濃縮,兩步富集可達到 30 倍濃縮。
適用于從人臍帶血單個核細胞(CBMC)或外周血單個核細胞(PBMC)中富集 CD34+ 細胞。
操作說明:
制備人CBMC或PBMC:通過Ficoll密度梯度離心法從人臍帶血或人外周血中分離出單個核細胞,收集后用PBS洗滌細胞,離心。離心結(jié)束后,棄去上清液,將CBMC或PBMC重懸于分選緩沖液中,并調(diào)整細胞濃度至1×10^8個細胞/mL。
注:分選緩沖液推薦配方:PBS,含有2 mM EDTA和2% FBS;或PBS,2 mM EDTA和0.5% BSA。緩沖液需預先經(jīng)0.22 μm濾膜過濾滅菌。
將100 μL的細胞懸液(含1×10^7個細胞)加入無菌流式管底部,再加入2 μL Biotin-Antibody Mix,混勻后在4°C下孵育10 min。
注:將細胞加入流式管底部時,避免沿管壁添加。若分選更多細胞,Biotin-Antibody Mix的用量需按比例增加。根據(jù)磁力架的不同,也可使用離心管進行細胞分選。
磁珠預處理:渦旋振蕩重懸磁珠,將所需量的磁珠移至1.5 mL離心管中,加入1 mL分選緩沖液,10000 g離心1 min,棄去上清。重復以上洗滌步驟一次。加入與原體積相同的分選緩沖液重懸磁珠。若使用20 μL磁珠進行清洗,則清洗后用20 μL分選緩沖液重懸。
細胞孵育結(jié)束后,在流式管中加入20 μL經(jīng)過預處理的Streptavidin Magnetic Beads,混合均勻,4°C下孵育10 min。
注:若分選的細胞數(shù)量較多,Streptavidin Magnetic Beads的用量需按比例增加。例如,分選5×10^7個細胞時,在500 μL細胞懸液中加入10 μL Biotin-Antibody Mix和100 μL Streptavidin Magnetic Beads。若分選的細胞少于1×10^7個,則應將細胞懸液體積補至100 μL,并加入2 μL Biotin-Antibody Mix和20 μL Streptavidin Magnetic Beads。
孵育結(jié)束后,在流式管中加入2.5 mL分選緩沖液,用移液器輕輕吹打混勻5次,避免劇烈振蕩或上下顛倒混勻。
將裝有細胞的流式管置于磁力架上靜置5 min。
將含有純化CD34+細胞的細胞懸液輕輕倒入無菌離心管中,倒出過程中流式管保持在磁力架上。500 g離心5 min,棄去上清,收集細胞。
注:為進一步提高CD34+細胞的富集效果,可根據(jù)實驗需要重復步驟2-7一次。
根據(jù)實驗要求洗滌細胞后,將其重懸于所需的緩沖液或培養(yǎng)基中,便可用于后續(xù)的分子生物學或細胞生物學實驗。
保存條件:4℃,2年。
陶術(shù) 人 CD34+細胞富集試劑盒(陰性選擇)
產(chǎn)品訂購信息:
C0066 人 CD34 + 細胞富集試劑盒(陰性選擇) 2mL (for 1×10^9 cells)
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